ПЦР на туберкулёз у детей и взрослых что это такое, как проводят тест, особенности анализов и резуль

ПЦР на туберкулёз у детей и взрослых что это такое, как проводят тест, особенности анализов и резуль

Анализ мочи на туберкулез

Туберкулез — инфекционная патология, вызванная палочкой Коха. Анализ мочи — один из методов диагностики внелегочного туберкулеза. Поражение почек занимает следующее место после туберкулеза легких по частоте возникновения. Заболевание может быть вторичным, в этом случае инфекция попадает в почки по кровотоку из другого органа. В то же время, если почечные клубочки здоровы, то проникнуть через них палочка Коха не может.

Показания к анализу

Анализ мочи на туберкулез назначается пациентам со следующими диагнозами:

  • Цистит.
  • Пиелонефрит.
  • Воспалительные патологии органов половой системы, в частности, аднексит у женщин, простатит и орхит у мужчин.
  • Мочекаменная болезнь
  • Гломерулонефрит.

Заподозрить присутствие палочки Коха в организме можно по наличию плохо поддающихся лечению воспалительных процессов. Очень часто туберкулез почек протекает атипично и выявить его опираясь на клиническую картину очень сложно. Поэтому данные анализов, рентгеноскопии очень важны.

Подготовка к анализу

Чтобы получить точный результат анализа мочи на туберкулез, рекомендуется соблюдать правила подготовки:

  • Для исследования берется средняя утренняя порция мочи.
  • Емкость для сбора материала должна быть сухой, чистой и стерильной.
  • Для анализа достаточно 100 мл. жидкости
  • Перед сбором материала обязательно проводят гигиенические процедуры
  • Образец должен попасть в лабораторию не позже, чем через два часа.
  • За сутки до обследования из рациона исключаются продукты, изменяющие цвет мочи. К ним относят морковь, свеклу.
  • Перед обследованием прекращают прием противотуберкулезных препаратов, таких как рифампицин. А также мочегонных, противовирусных лекарственных средств, ацетилсалициловой кислоты, витаминно–минеральных комплексов.
  • Женщинам не рекомендуется сдавать анализ при менструации из–за риска попадания крови в образец.
  • В период подготовки рекомендуется соблюдать питьевой режим, объем потребляемой жидкости не должен превышать два литра.

К моче для посева предъявляются более строгие требования.

В контейнер не должна попасть слизь из половых органов. Емкость не должна соприкасаться с внешними предметами, чтобы не нарушилась стерильность.

До попадания в лабораторию моча должна храниться в холодильнике, но не при минусовых температурах.

Причины ложных результатов

Ложный результат может быть получен в следующих случаях:

  • При нарушении стерильности полученного материала.
  • При угнетении микроорганизмов после приема лекарственных препаратов.
  • На начальных стадиях заражения, когда возбудитель только попал в организм.

При получении сомнительного результата, врач назначает повторную сдачу анализа.

Как проводится анализ

При подозрении на туберкулез проводится исследование урины тремя способами:

  • Бактериоскопический метод
  • Бактериологический метод
  • Биологический метод

Все три метода дают наилучший результат, если используются в комплексе. Вероятность постановки точного диагноза возрастает в несколько раз.

Нормы и расшифровка результата

Метод бактериоскопический. В этом случае палочку Коха ищут непосредственно в моче при помощи микроскопа. Предварительно материал окрашивается, благодаря чему возбудитель становится хорошо виден и его можно легко отличить от других микроорганизмов.

Это наиболее простой и быстрый способ исследования. В то же время из–за большого числа примесей, вероятность ошибки достаточно велика. В некоторых случаях для получения более точного результата используют метод флотации. По этой методике моча должна отстаиваться в течение суток. После этого проводят исследование осадка. Его обрабатывают определенным образом. Итогом такой обработки становится увеличение количества бактерий на единицу объема. Бактериоскопический способ считают предварительным. В дальнейшем, для подтверждения диагноза, назначаются другие методы исследования. По статистике точность данного метода приближается к 80%.

Бактериологический метод. В этом случае производят высевание предполагаемого возбудителя на питательную кровяную или картофельную среду. Далее материал помещается в термостат. После того, как происходит рост колонии, полученный образец сравнивают с эталонным. Для подтверждения диагноза представитель выращенной колонии должен совпадать:

  • С палочкой Коха внешним видом.
  • Образцы должны иметь характерную для возбудителя форму и цвет.
  • Микроорганизмы должны реагировать на питательные вещества как палочка Коха.
  • Выращенный возбудитель из урины должен определенным образом вступать во взаимосвязь со специфичными для палочки антителами.
Читайте также:  Аллергия на гель лак - чем лечить, что делать

Иногда длительное выращивание заменяют ПЦР. При обнаружении ДНК и РНК палочки туберкулеза.

Биологический метод. Используется в тех ситуациях, когда диагностировать патологию достаточно трудно. В этом случае возбудитель поселяется в живой организм. Данный метод используется, если нельзя определить болезнь с помощью других методов и при длительном течение патологии.

В этом случае точность полученного результата равна 100%. При отсутствии изменений в почках, микробактерия туберкулеза выявляется всегда, после заражения крыс или морских свинок. Для выяснения заражено ли животное, ему проводят анализ крови.

Когда и кому назначают анализ мочи на туберкулез

Туберкулезом заражаются независимо от социального статуса, возраста и места проживания. Помимо стандартных методов, таких как туберкулинодиагностика и ФЛГ, для выявления инфекции фтизиатры могут назначить анализ мочи на туберкулез.

Общие сведения

Инфицирование почек занимает второе место по распространенности после легочной формы заболевания. Преимущественно развивается у людей с запущенным поражением легких или костей в результате проникновения инфекции с кровью. Предрасполагает к оседанию бактерий в тканях мочеполового тракта нарушение уродинамики или местного кровообращения.

В норме через здоровые клубочки палочки Коха не проникают. Нахождение этих бактерий в моче становится достоверным признаком туберкулеза, что отличает его от других инфекций, для которых допустимы нижние границы присутствия.

Подготовка к анализам

Требования, которые выполняют перед тем, как сдавать ОАМ (общий анализ мочи):

  • используют полученную сразу после пробуждения среднюю порцию мочи;
  • материал собирают в чистую емкость в количестве 50-100 мл;
  • перед сдачей моют наружные половые органы без использования моющих средств;
  • полученный материал доставляют в лабораторию не позднее 10-11 часов утра (менее 2 часов после сдачи анализа).

Сбор мочи на бактериоскопию и посев проводят по тем же правилам, но более жесткие требования предъявляют к контейнерам для мочи. Они должны быть строго стерильны, поэтому не рекомендуют трогать их внутреннюю поверхность и края, а после наполнения сразу закрывать крышку. До доставки в лабораторию собранный материал хранят в холодильнике.

Перед любым анализом мочи рекомендуют в течение 1-2 дней ограничить употребление в пищу красящих продуктов: моркови, свеклы, черники.

Могут изменить показатели мочи и ее цвет: противотуберкулезные (рифампицин), мочегонные, противовирусные препараты, ацетилсалициловая кислота, витаминно-минеральные комплексы и пр.

Женщинам сдавать анализ необходимо в период отсутствия менструальных кровотечений.

В каких случаях назначают анализ

У туберкулезного поражения почек отсутствуют специфические симптомы, поэтому пациенты длительно, но без стойкого эффекта будут проходить лечение с различными урологическими или гинекологическими диагнозами:

  • циститом;
  • простатитом;
  • пиелитом;
  • пиелонефритом;
  • сальпингоофоритом;
  • мочекаменной болезнью.

Если же у человека уже диагностирована легочная инфекция, то при наличии симптомов поражения мочеполовой системы обязательно проводят анализ мочи на туберкулез почек трижды. Признаки заболевания, указывающие на инфицирование палочкой Коха, включают следующие жалобы:

  • боль в пояснице;
  • дизурия;
  • выделение крови или гноя с мочой.

Исследование мочи при туберкулезе легких преимущественно не определяет каких-либо изменений, а при вовлечении в процесс тканей мочеполовой системы в лаборатории находят отклонения в показателях, которые позволяют заподозрить диагноз туберкулеза:

  • pH меньше 4,0;
  • увеличение количества лейкоцитов и эритроцитов;
  • гвоздевидные лейкоциты в моче;
  • положительная реакция на белок;
  • гной в моче, особенно без бактериовыделения.
Читайте также:  Свиной грипп симптомы и лечение в домашних условиях

По анализу крови также выявляют неспецифичные изменения: анемию, лейкоцитоз. При этих изменениях может понадобиться дополнительное обследование пациента. У мужчин подозрением на туберкулез считают рецидивирующие симптомы поражения простаты, когда затруднено мочеиспускание, железа увеличена или сморщена, длительно выделяется гной или кровь со спермой.

Выявление туберкулеза не исключает его одновременное развитие на фоне других патологий органов мочевыделения.

Определение туберкулезной палочки

При подозрении на инфицирование почек микобактерией специалист назначит комплекс исследований, включая общие анализы крови и мочи, пробу Манту ребенку, рентгенодиагностику, УЗИ, КТ, МРТ. Но безусловным подтверждением наличия инфекции будет положительный анализ мочи на микобактерии туберкулеза.

Для обнаружения возбудителя или его антигенного материала используют следующие способы:

  1. Микроскопию по Цилю-Нильсену. После обесцвечивания материала серной кислотой наносят краску метиленовую синь. Микобактерии туберкулеза при окраске приобретают малиновый цвет и выделяются на фоне синих клеток. Это обусловлено устойчивостью палочек Коха к действию кислот. Чтобы повысить точность определения, рекомендуют забор мочи катетером.
  2. Люминесцентная микроскопия — при окраске ауромином палочки Коха светятся оранжево-желтым цветом. Чувствительность выше, чем при окраске по Цилю-Нильсену.
  3. Бактериологическое исследование — посев мочи на питательную среду (часто используют кровяную или картофельную). Оказавшись в благоприятных условиях палочки начинают размножаться. Но это длительный процесс и может занимать от 20 дней до 3 месяцев. Можно определить резистентность к противотуберкулезным средствам.
  4. Биологическая проба — основана на выявлении микобактерий в тканях морской свинки после подкожного введения ей исследуемой мочи. Это исследование требует времени: свинку усыпляют и препарируют примерно через месяц, если она не умерла ранее. Либо для более ранней диагностики животному проводят туберкулиновую пробу.
  5. Полимеразная цепная реакция — с помощью чувствительных систем выявляются в моче специфичные участки ДНК палочки Коха.

В некоторых случаях проводят провокационную пробу с подкожным введением туберкулина в дозе 20-100 ТЕ или облучением кожи инфракрасным лазером. В первом случае повторные анализы мочи проводят через 24 и 48 часов и сравнивают с первоначальным, во втором — через 10 дней. Положительным считают результат, характеризующийся увеличением количества эритроцитов и лейкоцитов в моче, выделением микобактерий.

Эффективность метода

При туберкулезном поражении почек изменение общего анализа мочи встречается не более чем у 60% пациентов. Выявление микобактерий при бактериоскопии подтверждает диагноз, но специфичность этого метода не превышает 80% (чувствительность при окраске по Цилю-Нильсену — более 100000 микробных тел в 1 мл, а при люминесцентном исследовании — более 10000 в 1 мл).

Более чувствительный посев на среды, но чересчур длительный. Выигрывает перед ними ПЦР на туберкулез:

  • результат получают за 4-5 часов;
  • высокая чувствительность;
  • определяет ДНК микобактерий в моче даже при легочном туберкулезе и отсутствии специфического процесса в почках;
  • возможность определения чувствительности к лекарственным препаратам.

Могут назначить это исследование вместо Манту у детей, если подозревается внелегочной туберкулез, есть аллергия на туберкулин или организм ребенка не вырабатывает антитела на возбудителя при его наличии в организме. Но есть небольшой процент как ложноотрицательных, так и ложноположительных результатов.

Вероятность неверного отрицательного результата возрастает у пациентов, которые длительно лечили заболевания урогенитального тракта антибиотиками. Такие препараты, как фторхинолоны и аминогликозиды, подавляют рост палочек Коха, но не убивают их до конца. Даже если один метод показал отрицательный результат, диагноз туберкулеза остается вероятным, поэтому врачи используют для верификации совокупность анализов и инструментальных исследований.

Читайте также:  Меню годовалого ребенка ~ Я happy МАМА

ПЦР: современные методики диагностики туберкулеза

28.03.16 09:56

С помощью ПЦР-диагностики можно своевременно не только обнаружить инфекцию, но и изолировать человека, назначив ему соответствующее лечение. Кроме того, данный анализ способен исследовать устойчивость микобактерий к известным во фтизиатрии медицинским препаратам, тем самым, позволяя подобрать правильную схему лечения, исключив из неё те лекарства, к которым есть устойчивость возбудителя.

Cправочно:

Полимера́зная цепна́я реа́кция (ПЦР) — метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). Помимо амплификации ДНК, ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с нуклеиновыми кислотами (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК) и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных). Метод основан на многократном избирательном копировании определённого участка нуклеиновой кислоты ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro).

Метод ПЦР имеет очень высокую информативность и позволяет легко и эффективно определять наличие микобактерии в организме, но, только если проводить анализ мокроты (если это туберкулез органов дыхания) или мочи (при туберкулезе орагнов мочевыделительной системы), а не крови. ПЦР анализ крови на туберкулез нельзя считать информативным, так как ДНК микобактерии туберкулеза в крови бывает только у больных туберкулезным сепсисом, что на практике встречается весьма редко.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет всего в течение нескольких часов обнаружить возбудителя инфекции, причем выявить можно даже 1-2 молекулы среди огромного количества.

Данный тест имеет массу достоинств, которые проявляются в следующем:
• 100%-ное выявление, так как в биологической пробе определяется от 10 до 100 клеток;
• специфичность теста очень высока: выявляется особенный фрагмент, который имеется только в конкретном возбудителе;
• скорость получения результата анализа – от 4 до 4,5 часа.

С помощью этой диагностики можно своевременно не только обнаружить инфекцию, но и изолировать человека, назначив ему соответствующее лечение. Кроме того, данный анализ способен исследовать устойчивость микобактерий к известным во фтизиатрии медицинским препаратам, тем самым, позволяя подобрать правильную схему лечения, исключив из неё те лекарства, к которым есть устойчивость возбудителя. Чтобы провести полимеразную цепную реакцию на устойчивость, используют гены, запоминающие невосприимчивость к некоторым лекарствам, после чего через двое суток можно получить результат.

Андрей Чередниченко, заведующий ПЦР-лабораторией: «На сегодняшний день во фтизиатрической службе СФО работают пять ПЦР-лабораторий. Лаборатория ННИИТ является одной из самых современных, здесь используется формат Real-Time ПЦР (или ПЦР в реальном времени). Эта методика позволяет не только выявить ДНК возбудителя туберкулеза, но и те его мутации, которые указывают на устойчивость к препаратам противотуберкулезного ряда. Одним из передовых методов ПЦР является метод гибридизации на стрипах, который позволяет провести определение микобактерий и их устойчивость к противотуберкулезным препаратам».

Актуальность проведения ПЦР-исследования на туберкулез прежде всего в том, что данная методика позволяет выявлять микобактерии у пациентов без бактериовыделения. Благодаря данной методике диагностировать туберкулез и назначать правильные схемы лечения (учитывая устойчивость к определенным препаратам) стало значительно легче.

Ссылка на основную публикацию
Пучеглазие — Глазные болезни — Справочник MSD Версия для потребителей
Офтальмопатия щитовидной железы Что это Что это такое? Офтальмопатия щитовидной железы - это болезнь иммунологического происхождения, которая влияет, с одной...
Пункция молочной железы как и для чего проводится, последствия
Особенности проведения пункции молочной железы Здравствуйте, дорогие читатели. Сегодня наша тема — пункция молочной железы . Что это за процедура,...
Пуриновая диета таблица полная версия для печати – Пуриновая диета таблица полная версия для печати
Низкопуриновая диета в таблице Общий объем выпиваемой жидкости 2-3 л в сутки. Диета при подагре в период обострения В остром...
Пучит живот после лапароскопии причины и лечение
Желчнокаменная болезнь – угроза №1? или жизнь после операции В крупнейших странах Европы, а также в США около 10% взрослого...
Adblock detector